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細(xì)胞培養(yǎng)箱被污染怎么消毒

2021-12-22 13:43:19

細(xì)胞培養(yǎng)箱被污染怎么消毒

  凡是混入細(xì)胞培養(yǎng)箱(細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境)中,對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染。細(xì)胞持續(xù)在污染環(huán)境中生長時(shí),輕者細(xì)胞生長緩慢,細(xì)胞分化變形,較重的細(xì)胞增殖停止,從瓶壁脫落,甚至死亡。不同的污染物對(duì)細(xì)胞的影響也有差別,有的影響是長期,緩慢和潛在的,而有的則能在很短的時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)胞生長或產(chǎn)生有毒物質(zhì)殺害細(xì)胞。那么,細(xì)胞培養(yǎng)箱被污染怎么消毒?下面就來聊聊細(xì)胞培養(yǎng)箱消毒方法。

一、細(xì)胞培養(yǎng)箱的污染源

  根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)箱污染源的不同,主要可以分成:生物性污染、化學(xué)性污染、物理性污染以及氣溶膠污染。

  1、生物性污染:這是最常見也是危害最大的污染。比如細(xì)菌、病毒、真菌,支原體等,這些污染源有可能是人為帶入,或是細(xì)胞在放入培養(yǎng)箱前已經(jīng)受污染,又或是箱體本身沒有消毒干凈。體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力,而培養(yǎng)基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而細(xì)胞微生物污染一旦發(fā)生往往是無法挽救的。

  2、化學(xué)性污染:培養(yǎng)箱中許多化學(xué)物質(zhì)都能夠引起細(xì)胞污染。比如細(xì)胞培養(yǎng)容器清洗過程中殘留的洗滌劑、加濕器中未純化的水、人為帶入的液體或氣體都可能成為化學(xué)性污染的來源。不同化學(xué)物質(zhì)對(duì)細(xì)胞污染不一樣,有的可能促進(jìn)或抑制細(xì)胞生長,有的甚至?xí)䴕⑺兰?xì)胞。

  3、物理性污染:培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素,如溫度、放射線、振動(dòng)、輻射(紫外線或熒光)會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響。物理性污染常常被人們所忽視或被籠統(tǒng)地歸為化學(xué)性污染,其主要是在代謝水平或分子水平上,影響細(xì)胞正常的生理過程。

  4、氣溶膠污染:氣溶膠是液體或固體微粒均勻地懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系,當(dāng)微粒是微生物時(shí),就是微生物氣溶膠,如果這種微生物是病原性的,就是病原微生物氣溶膠。細(xì)菌、病毒等病原體通過氣溶膠可在人與人、人與環(huán)境之間傳播。微生物氣溶膠可分為兩大類:一類是飛沫核氣溶膠,另一類是粉塵氣溶膠。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)許多操作都可以產(chǎn)生氣溶膠,并且大多可能是病原微生物形成的感染性氣溶膠,由于其氣溶膠分子小,漂浮在空氣中、粘附于人身上,易在空氣中擴(kuò)散而污染實(shí)驗(yàn)室的空氣。

二、細(xì)胞培養(yǎng)箱清潔消毒

  1、培養(yǎng)箱消毒:先用純水擦洗,接著用95的酒精擦洗,再照紫外就可以了。

  2、方法比較簡單,先用75%酒精擦拭內(nèi)壁,通風(fēng)10分鐘,紫外線照射30分鐘即可。

  3、通常用70%的乙醇擦洗,然后再用0、1%的新潔爾滅擦洗,不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1:1比例熏一遍、注意要是熏的話千萬注意混合之后馬上離開,然后密閉細(xì)胞培養(yǎng)室,味道很刺激的、在養(yǎng)細(xì)胞前消毒,否則,確實(shí)沒地方放細(xì)胞、

  4、通常處理方法是先用75%的酒精擦拭內(nèi)壁,接著用甲醛高錳酸鉀熏蒸一個(gè)晚上,再通風(fēng)一整天(同時(shí)打開紫外線照射)。

  5、熏蒸后吹一天是不夠的,起碼要一個(gè)星期才可以讓甲醛散盡,要不細(xì)胞長不好的。

  6、有的培養(yǎng)箱能加熱內(nèi)壁到90度,也有的帶有紫外線功能、常規(guī)應(yīng)該每周用酒精擦洗內(nèi)部一次、具體的操作請(qǐng)參考培養(yǎng)箱的手冊,或著咨詢培養(yǎng)箱技術(shù)支持、使用消毒劑應(yīng)小心,培養(yǎng)箱內(nèi)有檢測溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器,腐蝕性消毒劑或有機(jī)溶劑有可能損壞某些器件,請(qǐng)慎用、另外,揮發(fā)性的甲醛有毒,易燃、易爆、如果在培養(yǎng)箱內(nèi)殘留甲醛的話,細(xì)胞會(huì)死光光哦、總之,先看培養(yǎng)箱手冊,再聯(lián)系技術(shù)支持,方可萬無一失啊、

  7、常規(guī)什么也不放!硫酸銅的作用是抑制細(xì)菌生長(但多數(shù)用在處理污染的孔板)、因?yàn)楝F(xiàn)在的孵箱都有抑菌功能。

  8、在補(bǔ)充水時(shí)把水加熱一下,達(dá)到培養(yǎng)箱的溫度。

  9、實(shí)驗(yàn)室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺(tái)內(nèi)加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水、再加少量新潔爾滅,濃度沒關(guān)系、細(xì)胞養(yǎng)的都可以。

  10、把培養(yǎng)箱里的板層拿出來高壓一下,箱壁用75%酒精擦一遍,換用詩樂氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好。

三、細(xì)菌培養(yǎng)箱水盤出現(xiàn)霉菌怎么辦?

  細(xì)菌培養(yǎng)箱中的水盤里出現(xiàn)霉菌,有一種方法可以在不移除細(xì)胞的情況下能夠消滅培養(yǎng)箱中的霉菌,已經(jīng)長出霉菌,建議把所有細(xì)胞移出到其他培養(yǎng)箱。將這個(gè)培養(yǎng)箱全面消毒,噴酒精,紫外滅菌至少1個(gè)小時(shí)。因?yàn)槲覀兘M細(xì)胞染過菌,一旦培養(yǎng)箱不潔凈,會(huì)導(dǎo)致所有培養(yǎng)細(xì)胞都要染菌的,爆發(fā)以后很可怕。培養(yǎng)箱出現(xiàn)霉菌很可能是水槽的水不夠潔凈,一定要用超凈水超純水來填充水槽,避免霉菌生長。要定期更換水槽中的純水。一個(gè)月左右換一次。一個(gè)季度到半年要培養(yǎng)箱徹底滅菌一次。

  以上就是關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)箱被污染怎么消毒的相關(guān)介紹,供大家參考。

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