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PCR實(shí)驗(yàn)室的分區(qū)及各區(qū)的功能

2021-12-14 10:50:18

PCR實(shí)驗(yàn)室的分區(qū)及各區(qū)的功能

  PCR實(shí)驗(yàn)室有哪些分區(qū)?PCR實(shí)驗(yàn)室的各個分區(qū)的功能是什么?PCR實(shí)驗(yàn)室原則上分成四個區(qū):試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。每個獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū),同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié),使整個PCR實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

一、PCR實(shí)驗(yàn)室的四個分區(qū)

  1、試劑準(zhǔn)備區(qū)。此區(qū)主要是進(jìn)行試劑的制備,分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。試劑準(zhǔn)備區(qū)主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、振蕩器等。對于,試劑準(zhǔn)備區(qū)對氣流壓力的控制并沒有嚴(yán)格要求,通常在+10Pa。

  2、樣品制備區(qū)。此區(qū)主要進(jìn)行樣品的保存,核酸提取,貯存及期入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定DNA的合成。樣品制備區(qū)主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器、振蕩器等。樣品制備區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎,以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染, 一般為+10Pa。

  3、擴(kuò)增區(qū)。此區(qū)主要進(jìn)行DNA的擴(kuò)增。另外,已制備的DNA模板的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。擴(kuò)增區(qū)主要設(shè)備有:擴(kuò)增儀、冰箱、離心機(jī)、加樣器等。擴(kuò)增區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,為避免氣溶從本區(qū)漏出,一般為-25Pa。

  4、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。此區(qū)主要進(jìn)行擴(kuò)增產(chǎn)物的測定。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,一般為-25Pa,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。

二、PCR實(shí)驗(yàn)室防護(hù)消毒

  1、實(shí)驗(yàn)室空氣消毒:實(shí)驗(yàn)室每次檢測完畢后,需要進(jìn)行空間消毒,清除實(shí)驗(yàn)室殘留的核酸。

  2、工作臺面消毒:每天實(shí)驗(yàn)后使用消毒液進(jìn)行臺面、地面消毒。包括垃圾桶及垃圾袋都需要噴灑專用消毒液,確保病毒被殺滅。

  3、安全柜消毒:每天實(shí)驗(yàn)完成后,對生物安全柜進(jìn)行擦拭消毒。

  4、轉(zhuǎn)運(yùn)容器消毒:轉(zhuǎn)運(yùn)及存放標(biāo)本的容器,使用前后用消毒劑噴灑消毒。

  5、塑料或有機(jī)玻璃材質(zhì)消毒:使用過氧乙酸或過氧化氫噴霧(噴淋)消毒,或擦拭消毒。

  以上就是關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)室的分區(qū)及各區(qū)的功能、PCR實(shí)驗(yàn)室防護(hù)消毒的相關(guān)介紹,供大家參考。

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