PCR實(shí)驗(yàn)室，即基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室，是專(zhuān)門(mén)用來(lái)檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病。下面本文就來(lái)介紹一下PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)改造要求。

一、PCR 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要求

　　1、標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)物分析區(qū)或三個(gè)區(qū)域的最后一個(gè)區(qū)域(即擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū))，空氣流向應(yīng)由室外向室內(nèi)，可通過(guò)在室內(nèi)設(shè)置通風(fēng)櫥、排風(fēng)扇或其他排風(fēng)系統(tǒng)達(dá)到空氣流由室外向室內(nèi)流動(dòng)的要求。

　　2、PCR 實(shí)驗(yàn)室依據(jù)所使用的方法可分為試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增、產(chǎn)物分析等三或四個(gè)區(qū)域。只是使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室，有上述前面三個(gè)區(qū)域即可。各區(qū)域完全獨(dú)立分隔，不能有空氣直通。

　　3、PCR實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域儀器設(shè)備配備通常如下：

　　(1)標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本制備區(qū)。儀器設(shè)備主要應(yīng)有生物安全柜(最好為B2，能夠避免提取核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本間交叉“污染”，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。另外，還需要配備加樣器、臺(tái)式高速離心機(jī)(冷凍及常溫)、臺(tái)式低速離心機(jī)、恒溫設(shè)備(水浴和/或干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動(dòng)紫外燈等。

　　(2)標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室試劑準(zhǔn)備區(qū)。儀器設(shè)備主要應(yīng)有加樣器、冰箱、天平、低速離心機(jī)、混勻器、可移動(dòng)紫外燈等。可使用超凈工作臺(tái)作為試劑配制操作臺(tái)面。

　　(3)標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)物分析區(qū)。本區(qū)所使用的儀器設(shè)備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測(cè)序儀、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等。在理想情況下，PCR實(shí)驗(yàn)室試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備、擴(kuò)增三個(gè)區(qū)域可設(shè)置緩沖間。在緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。

　　(4)標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增區(qū)。主要儀器就是核酸擴(kuò)增熱循環(huán)儀(PCR儀，實(shí)時(shí)熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應(yīng)專(zhuān)用，并配備一個(gè)穩(wěn)壓電源或UPS，以防止由于電壓的波動(dòng)對(duì)擴(kuò)增測(cè)定的影響。此外，根據(jù)工作需要，還可配備加樣器、超凈臺(tái)等。

二、PCR實(shí)驗(yàn)室改造建設(shè)

　　1、PCR實(shí)驗(yàn)室裝修緩沖室、PCR擴(kuò)增區(qū)排風(fēng)機(jī)向外排風(fēng)，外墻及各門(mén)設(shè)有不同風(fēng)量以及可調(diào)的回風(fēng)口。空氣可以通過(guò)系統(tǒng)回風(fēng)口換到一個(gè)室內(nèi)。

　　2、PCR實(shí)驗(yàn)室改造實(shí)驗(yàn)區(qū)、緩沖室頂部及傳送窗均設(shè)有紫外線燈消毒。試劑可以制備區(qū)和標(biāo)本方法制備區(qū)可配備一個(gè)移動(dòng)式空氣紫外線燈進(jìn)行嚴(yán)格消毒。

　　3、醫(yī)院中PCR實(shí)驗(yàn)室不僅可以是分散式，也可以是組合式。通常完成一套PCR實(shí)驗(yàn)需要經(jīng)過(guò)四個(gè)過(guò)程：試劑制備、樣品數(shù)據(jù)處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物研究分析。如果實(shí)驗(yàn)過(guò)程管理需要，還應(yīng)不斷增加樣品破碎過(guò)程。

　　4、試劑制備和樣品制備區(qū)域?yàn)槲⒄龎海�核酸擴(kuò)增室和產(chǎn)品分析室為微負(fù)壓，防止有核酸氣溶膠擴(kuò)散污染試劑和樣品。 可以通過(guò)控制排氣量大于進(jìn)氣量來(lái)實(shí)現(xiàn)負(fù)壓效應(yīng)。

　　5、在理想的條件下，可在PCR實(shí)驗(yàn)室的緩沖室內(nèi)設(shè)置正壓，避免室內(nèi)空氣向外流出、室外空氣流入室內(nèi)。

　　6、若是房間深度允許，可在PCR內(nèi)設(shè)置專(zhuān)用走廊。

　　7、PCR實(shí)驗(yàn)室改造的時(shí)候各區(qū)域要有一個(gè)單向進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)流程、物流、人流和氣流，形成一種單向發(fā)展過(guò)程的防護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)環(huán)境干擾和實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程中核酸氣溶膠污染的假性結(jié)果。

　　8、若是實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)房間比較低，改造PCR實(shí)驗(yàn)室時(shí)可在走廊或?qū)嶒?yàn)室之外的新風(fēng)機(jī)和排風(fēng)機(jī)。管道應(yīng)該是圓形或扁平。鋪設(shè)后，需要進(jìn)行壓力和泄漏測(cè)試。接口導(dǎo)管和閥按照施工過(guò)程中嚴(yán)格操作，以最小化維護(hù)夾層去除的頻率。

三、PCR 實(shí)驗(yàn)室建設(shè)布局

　　1、實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)置緩沖間，工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗(yàn)工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的工作室，并有明顯的標(biāo)志，各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連，需安裝物品傳遞窗。每個(gè)工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫外燈的波長(zhǎng)為254m,安裝數(shù)量為每20m安裝一支40W的紫外燈。

　　2、PCR實(shí)驗(yàn)室理想的布局應(yīng)有一個(gè)專(zhuān)用走廊，試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)很規(guī)范地排列在一起，前三個(gè)區(qū)各有一個(gè)緩沖間，可供換工作服和工作鞋使用，頂上可裝一紫外燈。

　　3、內(nèi)實(shí)驗(yàn)區(qū)域設(shè)為正壓或常壓狀態(tài)，緩沖間內(nèi)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)(可上設(shè)一抽風(fēng)裝置)，使這三個(gè)區(qū)的空氣流向?yàn)橛蓪?shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)向外，緩沖間內(nèi)通向內(nèi)實(shí)驗(yàn)室和走廊的門(mén)可安裝一種連鎖裝置，當(dāng)一個(gè)門(mén)打開(kāi)時(shí)，另一門(mén)必須處于關(guān)閉狀態(tài)，防止出現(xiàn)兩個(gè)門(mén)同時(shí)打開(kāi)的情況。

　　4、產(chǎn)物分析區(qū)可不設(shè)緩沖間，但應(yīng)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)(裝一個(gè)排風(fēng)扇即可)、使空氣流向由外向內(nèi)，以防止擴(kuò)增產(chǎn)物的隨空氣流出。

　　5、每一區(qū)域都須有明確的標(biāo)記，工作按試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)至產(chǎn)物分析區(qū)單一流向進(jìn)行，各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋、實(shí)驗(yàn)記錄本和筆等都必須專(zhuān)用。

　　6、實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣品制備區(qū)到擴(kuò)增區(qū)再到擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不能逆向流動(dòng)。

　　以上就是關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)改造要求的相關(guān)介紹，供大家參考。

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